Nā ʻenehana kumu o ka Electrophoresis Gel Agarose (1)

1. Hoʻokaʻawale

Hoʻokaʻawale ʻia ʻo Gel electrophoresis i nā ʻano kū pololei (me nā gel kolamu a me nā gels papa) a me nā ʻano ākea (ka nui o nā gels slab) (Figure 6-18). ʻO ka mea maʻamau, ʻoi aku ka maikaʻi o ka hoʻokaʻawale ʻana i ke kūpaʻa ma mua o ke aniani, akā ʻoi aku ka maikaʻi o ka hoʻomākaukau ʻana i ka gel ākea: aia ke kākoʻo ma lalo o ka gel holoʻokoʻa, hiki ke hoʻohana i ka agarose haʻahaʻa; hiki ke hoʻomākaukau i nā papa gel agarose o nā kikoʻī like ʻole; ʻoi aku ka maʻalahi o ka hoʻomākaukau ʻana i ka gel a me ka hoʻouka ʻana; ʻO ke keʻena electrophoresis he maʻalahi ke kūkulu ʻana a me ke kumu kūʻai. Ma muli o ka hana ʻana o ka electrophoresis ākea me ka pā agarose gel i hoʻopiha piha ʻia ma kahi o 1mm ma lalo o ka ʻili o ka mea hoʻoheheʻe electrophoresis, ua kapa ʻia ʻo ia he electrophoresis submerged.

图片2

Electrophoresis Tank DYCP-31DN no ka electrophoresis gel agarose

2.Buffer System

I ka hoʻokaʻawale ʻana i ka waika nucleic, ʻae ka hapa nui o nā ʻōnaehana i nā ʻōnaehana mau. Hoʻohana mau ʻia nā mea pale electrophoresis TBE (0.08mol/L Tris·HCl, pH 8.5, 0.08mol/L boric acid, 0.0024mol/L EDTA) buffer a me THE (0.04mol/L Tris·HCl, pH 7.8, 0.02mol/L. sodium acetate, 0.0018mol/L EDTA) pale. Hoʻomākaukau ʻia kēia mau mea pale e like me 10x stock solutions a hoʻoheheʻe ʻia i ka manaʻo pono i ka wā e hoʻohana ai. ʻOkoʻa ka neʻe ʻana o ka DNA linear a me ka circular i ka gel agarose me ka buffer i hoʻohana ʻia. I loko o THE buffer, ʻoi aku ka nui o ka neʻe ʻana o ka DNA linear ma mua o ka DNA pōʻai, ʻoiai ma TBE buffer, ʻo ka ʻaoʻao ʻē aʻe.

3

3. Hoʻomākaukau i ka Agarose Gel

(1) Ka hoʻomākaukau ʻana o ka Horizontal Agarose Gel

(a) E hoʻomākaukau i ka manaʻo pono o ka gel agarose me ka hoʻohana ʻana i 1x electrophoresis buffer.

(b) E hoʻomehana i ka agarose e hoʻopau i ka hoʻoheheʻe ʻia i loko o kahi ʻauʻau wai e hoʻolapalapa ai, ma kahi mea hoʻoheheʻe magnetic, a i ʻole i loko o ka microwave. E hooluolu i ka solution agarose a hiki i 55°C a e hookomo i ka waikanu ethidium bromide (EB) i ka 0.5 μg/ml.

(c) E hoʻopaʻa i nā ʻaoʻao o ke aniani a i ʻole nā ​​papa acrylic me kahi liʻiliʻi o ka gel agarose, hoʻohui i kahi lei, a hoʻonoho i nā niho hui ma kahi o 0.5 ~ 1.0 mm ma luna o ka pā.

(d) E ninini mau i ka solution agarose gel i hoʻoheheʻe ʻia i loko o ke aniani a i ʻole ka poʻi paʻi acrylic (e pili ana ka mānoanoa i ka nui o ka laʻana DNA), e pale ana i ka hoʻokomo ʻia ʻana o nā ʻōhū ea. E hoʻopaʻa maoli ma ka lumi wela.

(e) Wehe akahele i ka lehu ma hope o ka paʻa ʻana. E hoʻohui i ka nui kūpono o ka pale electrophoresis i ka pahu gel, e hōʻoia i ka hoʻokomo ʻana o ka pā gel ma kahi o 1 mm ma lalo o ka ʻili o ka pahu electrophoresis.

(2) Hoʻomākaukau i ka Vertical Agarose Gel

(a) Wehe i ka momona a i ʻole ke koena mai nā pā aniani ma ka holoi ʻana me ka ethanol.

(b) E kau i nā pā āwae ma waena o nā pā o mua a me hope, e hoʻolike i nā ʻaoʻao o nā pā spacer me nā pā o mua a me hope, a hoʻopaʻa iā lākou me nā pipili.

(c) E hoʻohui i 2% agarose i 1x buffer ma waena o nā ʻaoʻao o nā papa spacer e hana i kahi plug agarose 1 knm kiʻekiʻe ma lalo o ke keʻena hoʻolei gel.

(d) E ninini i ka gel agarose i hoʻoheheʻe ʻia ma ka manaʻo i makemake ʻia, i hoʻomākaukau ʻia i 1x buffer, i loko o ke keʻena gel a hiki i 1 knm ma lalo o luna.

(e) E hoʻokomo i ka lehu, e pale aku i ka hoʻopaʻa ʻana i nā ʻōhū ea ma lalo o nā niho lehu. I kekahi manawa, ʻike ʻia nā wrinkles ma nā niho i ka wā e hoʻoluʻu ai ka gel agarose; i ia mau hihia, e hoʻohui wale i kahi agarose hehee ma luna e paʻa ai.

(f) Wehe i ka lehu. No ka pale ʻana i ka leaka paʻa i loko o ka pahu hoʻouka, e hoʻopaʻa i ka pilina ma waena o ka pā gel agarose a me ke keʻena electrophoresis me 2% agarose a hoʻohui i ka nui o ka buffer.

(g) Hoʻohui i 1x electrophoresis buffer i ke keʻena gel.

(h) E hoʻouka pono i nā laʻana DNA ma luna o ka gel agarose ma lalo o ka pahu.

3

ʻO ka ʻike hou aku e pili ana i ka ʻike kumu e pili ana i ka electrophoresis gel agarose, e kaʻana like mākou i kēia pule aʻe. Makemake ʻoe e kōkua kēia ʻike i kāu hoʻokolohua.

ʻO Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) he loea i ka hana ʻana i nā mea hana electrophoresis no nā makahiki he 50 me kā mākou hui loea loea a me ke kikowaena R&D. Loaʻa iā mākou ka laina hana hilinaʻi a piha mai ka hoʻolālā ʻana i ka nānā ʻana, a me ka hale kūʻai, a me ke kākoʻo kūʻai aku. ʻO kā mākou huahana nui ʻo Electrophoresis Cell (tank / chamber), Electrophoresis Power Supply, Blue LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gel Image & Analysis System etc.

Ke ʻimi nei mākou i nā hoa, ʻelua OEM electrophoresis tank a me nā mea hoʻolaha i hoʻokipa ʻia.

Inā loaʻa iā ʻoe kahi hoʻolālā kūʻai no kā mākou huahana, e ʻoluʻolu e hoʻokaʻaʻike mai iā mākou. Hiki iā ʻoe ke hoʻouna mai iā mākou i ka leka uila[palapala leka uila]a i ʻole[palapala leka uila], a i ʻole e kelepona iā mākou ma +86 15810650221 a i ʻole e hoʻohui iā Whatsapp +86 15810650221, a i ʻole Wechat: 15810650221.

E ʻoluʻolu e nānā i ka QR code e hoʻohui ma Whatsapp a i ʻole WeChat.

2


Ka manawa hoʻouna: Dec-07-2023